鹵蟲卵去殼和孵化的簡單工藝

国产v亚洲v天堂a鹵蟲幼體,在水產養殖業上被廣泛用來飼養魚類和甲殼類的幼苗(Sorgeloos?et?al.?1983)。通常從生產商處得到卵,經孵化,來生產鹵蟲無節幼體(Vanhaecke和Sorgeloos,1983)。卵為壹個休眠胚胎,包被在壹堅硬的脂蛋白殼或卵殼中(Morris和Afzelius,1967;Anderson?et?al.,1970)。通常孵化鹵蟲的方法是卵在鹽水中經24-48h孵化,然後將無節幼體從未孵化的卵和介殼中分離出,孵化工藝比較簡單,而無節幼體的分離則費時而且效率較低。但分離步驟是必須的,因為未孵化的鹵蟲卵以及它的介殼不能被消化,並且可阻塞小魚的腸管而致死亡(Sorgeloos和Persoone,1975)。

国产v亚洲v天堂a孵化鹵蟲的更為有效的方法是在孵化和孵出前用次氯酸溶液(漂白劑提供OCI)使卵去殼(Sorgeloos?et?al,1977)。次氯酸化學去殼法對未孵化胚胎的活力無影響(Morirs和Afgelius,1967)。因而可省去無節幼體的分離過程。因為100%的去殼卵(孵化和未孵化的)都能被攝食。實際上,去殼後孵化率增加了(12個家系的鹵蟲平均增加26.8%,Sorgel00s et?al,1983)。這是因為無節幼體不需破碎卵殼,去殼還有在孵化前消毒和防止帶入外源病源有機體(Gilmour?et?al.,1975;Wheeler?et?al.,1979)或汙染(Johns?et?al.,1980)的好處。這些病源有機體可能粘附在卵的外層。盡管有這麽多明顯的好處,但通常養殖者並不采用此方法,由於他們對此工藝不熟悉或認為太復雜不實用。

這裏介紹壹種簡單的改進了的Sorgefoos?et?al.(1977)鹵蟲卵去殼和孵化工藝,該工藝已成功地在我們的研究中應用多年(如Busack,1983;Campton和Gall,1988)。它是用大鹽湖和聖福蘭西斯克灣的鹵蟲卵加以完善的。

壹般用3-5g鹵蟲卵在1升海水(28gNaCl/L)中孵化24-48h後供以養殖,從數量和工藝來說,可推廣到大規模養殖。

首先將3-5g大鹽湖卵在150mL自來水中水化1小時。水化在低氣流條件下在15cm塑料漏鬥中進行,漏鬥出口塞上橡皮塞,塞上鉆壹小孔,將氣流管道系統和氣石插入橡皮塞孔內。水化期間每隔幾分鐘將漏鬥邊緣的卵刮去並用壹橡皮刮勺徹底混合。

卵水化後,向漏鬥加3mL?N?NaOH和150mL?5.25%次氯酸鹽(如加州奧克蘭的Clorox公司的Clorox漂白液),最後形成接近2.6%的次氯酸鹽和0.01N NaOH的溶液(PH≥10;Bruzgemon?et?al.,1980)。加入漂白劑後,立即記錄時間,並調節通過漏鬥的氣流防止起泡,去殼在低氣流不斷攪拌條件下進行3.5-4分鐘,或直到卵完全去殼。去殼後卵由暗褐色變成灰色再到橙色,並失去浮性,當卵完全變成橙色並失去浮性時,去殼即完成,迅速將卵從漏鬥沖刷到壹上好的網眼濾器中(100-150μm),用流量恒定的自來水漂洗1-2分鐘,直到嗅不到氯氣味,然後把卵沖刷入孵化器中。孵化器容積為1升,含NaCI?28g,預先用0.5L自來水將鹽在孵化器中溶解,而後加水到IL,去殼卵在24-28℃從孵化器底部供以低氣流條件下,經24-28小時可孵出,出殼卵的孵化,用2L聚醋缸(45℃變形),用壹個5mm塑料通風管通過聚醋缸蓋上的孔,伸到最底部。

當剛孵出的無節幼體開始攝食時,將孵化器中的內含物倒入壹個細網目的過濾器,用自來水反復沖洗,然而將無節幼體和未孵化卵收集到壹個容器中,即可用作餌料。

聖弗蘭西斯科灣卵的去殼和大鹽湖的卵相似,但(a)卵水化1.5-2h,(b)用10ml?2N?NaOH,(c)去殼壹般持續6-8分鐘。聖弗蘭西斯科灣的卵比大鹽湖的卵抗去殼力強。

據Bruggeman?et?al(1980)試驗,氯化物殘余主要吸附在去殼卵上,即使充分洗滌後,其殘余量仍為0.2mg/g卵。在0.1N?HCI或醋酸中浸泡兩次,可使氯化物殘余失活(Sorgeloos?et?al,1983)。但我們認為酸化是不必要的;我們未用酸處理去殼卵,但結果都很好。然而去殼後我們馬上進行培養,所以卵在作餌料前,必定已在鹽水溶液中漂洗了24-28h。去殼卵也可直接用作餌料或脫水貯存後再用(Sorgeloos et?al?1983),但這時氯化物殘余的失活可能是必要的。

大概是Nakanishi?et?al.(1962)首先提出去殼辦法。Morris和Afzelius(1967)使其進壹步完善精練,且引起了水產學家Sorgeloos?et?al.的註意(1977)。隨後Sorgeloos和他的合作者詳細地研究了去殼反應(如Bruggeman?et?al?1980),並不厭其煩地詳細論述了最大限度地增加孵化率(每克卵生產無節幼體總量)工藝和處理卵的效能,但壹般認為這些復雜的工藝對絕大多數實用者來說是不必要的。

 

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