Hunter微量元素溶液配置方法

国产v亚洲v天堂aTAP培養基是比較難配置的藻類培養基之壹,其中的Hunter微量元素貯存液(Hunter’s trace elements)是非常常用的微生物培養基添加劑,為微生物的生長提供必需的微量元素。Hunter’s微量元素溶液配方是Hunter等人1950年發表的,至今配方在很多不同微生物培養基中都有使用,包括衣藻、曲黴等。Hunter微量元素貯存液常用來配制基礎培養基。

国产v亚洲v天堂aHunter’s trace elements配制起來十分復雜,且由於其中有易氧化的亞鐵離子和二價錳離子,因此有效的配制方法非常重要,否則配制出來的溶液則起不到應有的效果。

 

Hunter’s微量元素溶液配方與配制方法

1000X Hunter微量元素溶液的配方如下:

Hunter's trace elements Stock

Hunter’s trace elements Stock

標準配制方法:
1. 除EDTA外,將以上溶液混合,加熱煮沸,加入EDTA溶液。此時溶液應該為綠色。
2. 待溫度降至70度時,加入80ml 20%氫氧化鉀溶液(預熱)。
3. 待溶液溫度冷卻至室溫時定容至1L 。
4. 用錐形瓶盛裝配制好的Hunter’s trace elements,用棉花塞堵住瓶口。每天晃動壹次,使空氣流通。或用10ml移液管反復吹打溶液,效果更佳。如此持續1~2周。
5. 用兩層濾紙過濾Hunter微量元素貯存液,濾出溶液應該是清澈的,否則再過濾壹次,直到最終溶液澄清為止。
6. 將溶液分裝後低溫保存。此方法法可放大。

新配的Hunter微量元素溶液是淺綠色,透明,放置壹段時間後逐漸變成深紅色,最終為紫色,並且在溶液底部生成鐵銹色沈澱。如果沒有沈澱生成,檢測pH,用氫氧化鉀或鹽酸調節至6.7。

Hunter’s trace elements終溶液應該是波爾多酒紅色,或棗紅色。但pH的微小變動會影響溶液顏色。作者補充說,自己曾配制過壹批葡萄紫色的,並沒有影響效果。

Scott和Kafer對Hunter微量元素溶液的配制方法做了改良,以下是改良後的配制方法:

Hunter's trace elements SolutionA

Hunter’s trace elements SolutionA

溶液A的配制:
1. 稱取以上組分,按照給出的順序,依次加入到80ml去離子水中。不能用自來水,不能用純凈水!
2. 用KOH顆粒調節pH至5.5。不能用氫氧化鈉調節pH!

配制好的溶液A呈金黃色,透明。

Hunter's trace elements SolutionB

Hunter’s trace elements SolutionB

溶液B的配制:稱取以上組分,按照給出的順序,依次加入到80ml去離子水中,溫和加熱攪拌至完全溶解。將溶液A和溶液B混合,先用KOH顆粒,再用KOH溶液調節pH至6.5,定容至200ml。放4度冰箱中保存。不能用氫氧化鈉調節pH!

Hunter’s trace elements終溶液配制方法

與傳統配制方法壹樣,剛剛配制好的溶液呈淺綠色,透明。放置2周後Hunter微量元素溶液應該變成紫色,但不會形成沈澱。此時溶液才能使用。即使有沈澱形成也不會影響使用,相反,有沈澱存在效果會更好。如果沒有以上現象出現,棄掉,重新配制。

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